詳細(xì)介紹
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸,;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),,如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月,。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸,;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,,如懸浮的細(xì)胞較多,,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胚胎干細(xì)胞 |
組織來(lái)源 | 囊胚 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自囊胚胚胎組織,;胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell,,ESCs,簡(jiǎn)稱ES,、EK或ESC細(xì)胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,,它具有體外培養(yǎng)無(wú)限增殖、自我更新和多向分化的特性,。無(wú)論在體外還是體內(nèi)環(huán)境,,ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。進(jìn)一步說(shuō),,胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)是一種高度未分化細(xì)胞,。它具有發(fā)育的全能性,能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官,,包括生殖細(xì)胞,。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),,細(xì)胞核大,有一個(gè)或幾個(gè)核仁,,胞核中多為常染色質(zhì),,胞質(zhì)胞漿少,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,。體外培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞排列緊密,呈集落狀生長(zhǎng),。用堿性磷酸染色,,ES細(xì)胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色,。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,,形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴,。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣,,多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米~18 微米,,豬,、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深,,直徑12 微米~18 微米,。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別,有其特定的生長(zhǎng)特性和特定的標(biāo)志,,例如堿性磷酸活性非常高,,帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA),人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60,、TRA-1-81等標(biāo)志,,這些特性和標(biāo)志均可以用于對(duì)胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,除此之外,,胚胎干細(xì)胞還可以在體外傳代,,并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層(MEF)上培養(yǎng)時(shí),,胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖,,長(zhǎng)期保持核型正常和穩(wěn)定,凍存解凍也不影響不分化的特性,。另外,,胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒活性,,目前證明端粒與細(xì)胞衰老密切相關(guān),,多數(shù)成熟細(xì)胞的端?;钚远己艿汀_@些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點(diǎn),,也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長(zhǎng)的原因,。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用分離囊胚組織,去除胚胎透明帶,、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),,胰消化傳代純化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含LIF,、BMP,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 短梭形,、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.025%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
收到如何處理:
1、首先,,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
FITC標(biāo)記小鼠抗人CD19單克隆抗體 突觸受體相關(guān)蛋白43封閉多肽 大鼠1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒
叉頭蛋白P3抗體 磷脂酰絲氨脫羧PISD封閉多肽 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫分析體(sEPCR)試劑盒ELISA
尿苷二磷葡糖醛基轉(zhuǎn)移1A7抗體 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子1/B淋巴細(xì)胞刺激因子3封閉多肽 大鼠CD30分子(CD30)ELISA檢測(cè)試劑盒
胃粘液抗體 DISC1 C端封閉多肽 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)elisa試劑盒
磷化組胺受體H1抗體 小核核糖核蛋白E封閉多肽 大鼠β細(xì)胞(BTC)試劑盒elisa
脫帽1A抗體 脈周蛋白1封閉多肽(胃癌抗原蛋白Ga50) 大鼠血管生成2(ANG-2)檢測(cè)試劑盒elisa
17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體 HRC蛋白封閉多肽 大鼠血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒
磷化帕金蛋白抗體 肌相關(guān)蛋白1封閉多肽 大鼠血管生長(zhǎng)(ANG)試劑盒ELISA
X染色體開(kāi)放閱讀框66抗體 磷化酪蛋白激casein kinase Iα封閉多肽 大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA檢測(cè)試劑盒
磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 鈣結(jié)合蛋白39封閉多肽 大鼠(cAMP)elisa試劑盒
骨堿性磷抗體 GRHL3蛋白封閉多肽 大鼠(cAMP)試劑盒elisa
半胱天冬-3原抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21封閉多肽 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)檢測(cè)試劑盒elisa
核糖體S6蛋白激抗體 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1封閉多肽 大鼠白介9(IL-9)ELISA試劑盒
胱硫醚γ裂解抗體 重組人冠狀病毒HCoV-NL63核蛋白 大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒ELISA
組織胺H4受體抗體 ZC3H13蛋白封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞粘附分子CD112抗體 原癌基因M-ras封閉多肽 大鼠孕激/孕酮(PROG)elisa試劑盒
磷化周期依賴性激2抗體 肌肉骨骼受體酪氨激封閉多肽 大鼠雌激(E)試劑盒elisa
程序性死亡配體1(CD274)抗體 核仁磷蛋白2封閉多肽 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠胚胎干細(xì)胞MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MM.1S細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
MOLT-4人急性淋巴母白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOLT-4細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
MOLT-4人急性淋巴母白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOLT-4細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
MonoMac6人急性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MonoMac6細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
MonoMac6人急性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MonoMac6細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
MRC-5(有限人胚肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MRC-5(有限細(xì)胞系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
MRC-5(有限人胚肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MRC-5(有限細(xì)胞系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML