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人口腔黏膜成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:33:51瀏覽次數(shù):282

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 口腔黏膜組織
人口腔黏膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106TCMK-1小鼠腎小管上皮細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106TM3小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自口腔黏膜組織,;口腔各壁都有黏膜覆蓋,口腔黏膜在組織學(xué)上由上皮和固有層組成,,并借黏膜下層與深部組織相連,??谇火つさ那胺脚c唇部皮膚相連,,后面與咽部黏膜相延續(xù),是消化道的前端,,因此其結(jié)構(gòu)和功能具有皮膚和消化道黏膜的某些特點(diǎn),。人口腔黏膜成纖維細(xì)胞主要來自口腔黏膜固有層組織。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人口腔黏膜成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

口腔黏膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

Snail蛋白抗體 細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-3封閉多肽 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒

蛋白酪氨磷-1B抗體 促微管蛋白聚合蛋白家族成員2封閉多肽 小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒ELISA

肝細(xì)胞粘附分子抗體 NKAPL蛋白封閉多肽 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA檢測試劑盒

脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 磷脂磷2b封閉多肽 小鼠解整合樣金屬9(ADAM9)elisa試劑盒

磷化原癌基因RAF1抗體 同源異型盒基因HOXA5蛋白封閉多肽 小鼠氧化型(GSGS)試劑盒elisa

G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體 睪丸特異定蛋白質(zhì)編碼Y1封閉多肽 小鼠還原型(GSH)檢測試劑盒elisa

粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3抗體 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰羥化4封閉多肽 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒

表皮生長因子受體5抗體 防御β-121/β-defensin 121封閉多肽 小鼠c-fos試劑盒ELISA

英文名稱: NF-L 胰島樣肽5封閉多肽 小鼠c-junELISA檢測試劑盒

二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移抗體 活化半胱胺蛋白-2封閉多肽  小鼠抗透明帶抗體(aZP)elisa試劑盒

嗜粒細(xì)胞趨化因子/蛋白/Eotaxin抗體 G氨基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)試劑盒elisa

分泌和跨膜蛋白1抗體 酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1封閉多肽 小鼠嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)檢測試劑盒elisa

微管相關(guān)蛋白Tau-4抗體 重組人CD105蛋白 小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒

泛樣蛋白特異性2抗體 整合β1結(jié)合蛋白2封閉多肽 小鼠D-乳脫氫(D-LDH)試劑盒ELISA

N-鈣粘附分子抗體 CD4封閉多肽 小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA檢測試劑盒

枯草桿菌同工1抗體 TP53調(diào)節(jié)激封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)elisa試劑盒

單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 金屬磷酯1封閉多肽 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒elisa

轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 磷化細(xì)胞間粘附分子1封閉多肽 小鼠(LZM)檢測試劑盒elisa
人口腔黏膜成纖維細(xì)胞AC16人心肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AC16細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

ACHN人腎腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ACHN細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

ACHN人腎腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ACHN細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

AGS人胃腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AGS細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

AGS人胃腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AGS細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

ARPE-19人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ARPE-19細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

ARPE-19人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ARPE-19細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

 


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