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大鼠骨外膜細胞

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更新時間:2023-04-21 14:49:35瀏覽次數(shù):208

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨組織
大鼠骨外膜細胞的相關(guān)產(chǎn)品:PK-15豬腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLPK-15豬腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLPT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLPT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLPIEC豬髖動脈內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125ML

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠骨外膜細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨外膜組織,;骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜,;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細胞,,稱為成骨細胞,,這種細胞具有使骨骼生長的功能,。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞,,稱為破骨細胞,。這兩種細胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細胞像建筑工人,,不停地生成新的骨組織,,破骨細胞則像維修工人,不停地清除老化,、死亡,、破碎的骨結(jié)構(gòu),,并且還負責拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,,從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學的需要,。正常情況下,兩種細胞之間處于動態(tài)的平衡之中,,完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝,。骨折之后,成骨細胞首先啟動,,從而促使新骨痂的生成,,即骨折的愈合。但是,,股痂只是恢復了骨的連續(xù)性,,往往不符合生物力學的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 鋅指蛋白75A封閉多肽 人妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒

β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 磷化核糖體S6激RSK2封閉多肽 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA Kit

尿抗體 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白6封閉多肽 人抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒

環(huán)指蛋白160抗體 核糖核4封閉多肽 人妊娠皰疹抗體(HG)試劑盒 ELISA

單核細胞趨化誘導蛋白1抗體 膜相關(guān)環(huán)指蛋白10封閉多肽 人胎盤生長因子(PLGF)ELISA檢測試劑盒

SEC14樣蛋白2抗體 細胞色P450 4V2封閉多肽 小鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)ELISA Kit

磷化周期依賴激2抗體 精子頂體膜相關(guān)蛋白4封閉多肽 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒

離子型谷氨受體4抗體 SAMD14封閉多肽 小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 ELISA

分泌型磷脂A2抗體 6號染色體開放閱讀框封閉多肽 小鼠γ干擾(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒

糖蛋白C抗體 鋅指蛋白695封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit

DHX35蛋白抗體 重組腸道病毒71型/手足口病病毒3CD蛋白 小鼠白介13(IL-13)ELISA試劑盒

眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 緊密連接蛋白20封閉多肽 小鼠白介18(IL-18)試劑盒 ELISA

11號染色體開放閱讀框74抗體 KIAA0247蛋白封閉多肽 人(TM)ELISA檢測試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體 堿性鞘磷脂7封閉多肽 人Ⅶ(FⅦ) ELISA Kit

纖維鞘相互作用蛋白2抗體 磷化半胱氨9封閉多肽 人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒

錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白封閉多肽 人原(PT) 試劑盒 ELISA

原鈣粘蛋白γA12抗體 肝細胞生長因子激活蛋白/HGF activator封閉多肽 人補體因子D(CFD)ELISA檢測試劑盒

急性髓細胞白血病1蛋白1/2抗體 磷化周期B1封閉多肽 人血漿纖維連接蛋白(pFN) ELISA Kit
大鼠骨外膜細胞大鼠鞏膜成纖維細胞英文名稱:大鼠鞏膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞英文名稱:大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠鼻腔粘膜上皮細胞英文名稱:大鼠鼻腔粘膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠眼外肌成纖維細胞英文名稱:大鼠眼外肌成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠眼微血管內(nèi)皮細胞英文名稱:大鼠眼微血管內(nèi)皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞英文名稱:大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞英文名稱:大鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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