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大鼠胰島β細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胰腺組織
大鼠胰島β細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠外根鞘細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠脂肪干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠胰島β細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳suan氫鈉,、胰dan白原、脂肪,、淀粉等,。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞,、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,,升高血糖,;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖,;γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑su,,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌,;PP細(xì)胞分泌胰多肽,,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞,,即胰島B細(xì)胞,,是胰島細(xì)胞的一種,屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種,,能分泌胰島素,,與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損,、胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足(胰島素抵抗),,會(huì)使血糖升高,從而引發(fā)糖尿病,。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤,,引起惡性血糖降低癥狀。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先用膠原消化分離得到胰島,、再用胰逐級(jí)消化胰島制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Insulin含量檢測(cè),,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

KIAA1486蛋白抗體 干擾調(diào)節(jié)因子3封閉多肽 

磷化激M2抗體 蛋氨亞砜還原B3封閉多肽 

糖蛋白gp330抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框109封閉多肽 

皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子抗體 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7封閉多肽 

轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體 磷化血管生成受體2封閉多肽 

染色體相關(guān)蛋白CAP抗體 泛樣蛋白特異性2封閉多肽 

磷化p21激活激1/2/3抗體 CTP合成2封閉多肽 

巖藻糖轉(zhuǎn)移1抗體 跨膜蛋白180封閉多肽 

線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體 KIAA0355蛋白封閉多肽 

NLRP11蛋白抗體 G蛋白家族RAB21蛋白封閉多肽 

補(bǔ)體C4BPA蛋白抗體 RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)ab6C封閉多肽 

E3泛連接抗體 分泌載體膜蛋白2封閉多肽 

鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 IMPG2蛋白封閉多肽 

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白11抗體 HS6ST3蛋白封閉多肽 

磷化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 DNAJC15封閉多肽 

鋅指蛋白530抗體 神經(jīng)氨4封閉多肽 

糖尿病相關(guān)同源結(jié)構(gòu)域蛋白SIX5抗體 磷化白細(xì)胞介-7受體a封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體 鉀離子通道蛋白5封閉多肽 
大鼠胰島β細(xì)胞10×多聚賴氨英文名稱:10×多聚賴氨10mL

明膠水溶液英文名稱:Gelatin100mL

膠原I英文名稱:膠原I100mg

膠原II英文名稱:膠原II100mg

膠原IV英文名稱:膠原IV100mg

細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液英文名稱:細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液500mL

小鼠重組 LIF 英文名稱:LIF MouseRecombinant10ug


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