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人肝星狀細胞

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更新時間:2023-04-23 09:47:02瀏覽次數(shù):235

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝臟組織
人肝星狀細胞的相關(guān)產(chǎn)品:細菌清除劑 2000x 細胞培養(yǎng)添加劑2 mL支原體PCR檢測試劑盒,,20 次細胞培養(yǎng)添加劑20 Rxns支原體PCR檢測試劑盒,50 次細胞培養(yǎng)添加劑50 Rxns支原體PCR檢測試劑盒,,100 次細胞培養(yǎng)添加劑100T Rxns細胞培養(yǎng)箱水盤除菌劑,,100 ×細胞培養(yǎng)添加劑100 mL

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,,并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,,肝上面則與膈及腹前壁相接,。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、維生素A貯存細胞,、竇周細胞,、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞,,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞,。正常情況下,HSC處于靜止狀態(tài),,當肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機械刺激等損傷時,,HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍SC可通過增生和分泌細胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié),。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成,、分泌細胞外基質(zhì)的主要來源,,在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟*的間充質(zhì)細胞,,約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%,。作為肝臟合成細胞外基質(zhì)的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖,、糖蛋白等細胞外基質(zhì)成分,,合成一定量的膠原以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié),。此外,,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子,、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合灌流消化、低速離心,、密度梯度離心制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA,、Desmin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人肝星狀細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

跨膜蛋白28/TMEM28抗體 含賴氨卷曲螺旋蛋白1封閉多肽 

尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體 重組人Bax蛋白 

細胞色P450 7A1抗體/7a羥化抗體 嗅覺受體52D1封閉多肽 

磷化著絲粒蛋白A 生長激釋放激封閉多肽 

心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 跨膜蛋白SEMA5B封閉多肽 

氨肽Q抗體 細胞間粘附分子4封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化細胞核因子NF-κB p65封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激PCTK2抗體 畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1封閉多肽 

賴氨,,天冬氨,谷氨,,亮氨相關(guān)序列抗體 程序性死亡1封閉多肽 

組蛋白精氨甲基轉(zhuǎn)移5抗體 絲氨甲基化cSHMT封閉多肽 

神經(jīng)肽NPSF抗體 上皮細胞膜蛋白2封閉多肽 

凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白15樣蛋白抗體 γ氨基丁運載蛋白2封閉多肽 

甲基轉(zhuǎn)移樣蛋白10抗體 胎盤特異基因8蛋白封閉多肽 

LMO7蛋白抗體 10封閉多肽 

二磷核苷激7抗體 FLJ39378蛋白封閉多肽 

ZCWCC1抗體 角化蛋白S100A18封閉多肽 

富亮氨重復(fù)激2單克隆抗體 平滑肌蛋白3封閉多肽 

6號染色體開放閱讀框120抗體 蛋白激A受體2α亞基封閉多肽 
人肝星狀細胞IMDM(不含L-)500mL-

PA319細胞專用培養(yǎng)基125mL×4PA319細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持PA319細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含PA319細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于PA319細胞的體外培養(yǎng),。

大鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠腎成纖維細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠腎成纖維細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠腎成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基100mL人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人關(guān)節(jié)軟骨細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含人關(guān)節(jié)軟骨細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人關(guān)節(jié)軟骨細胞的體外培養(yǎng),。

大鼠胰島β細胞培養(yǎng)基100mL大鼠胰島β細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠胰島β細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠胰島β細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于大鼠胰島β細胞的體外培養(yǎng),。

小鼠腎小球上皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠腎小球上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腎小球上皮細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠腎小球上皮細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腎小球上皮細胞的體外培養(yǎng),。

BT-549細胞專用培養(yǎng)基125mL×4BT-549細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持BT-549細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含BT-549細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于BT-549細胞的體外培養(yǎng),。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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