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大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:36:41瀏覽次數(shù):233

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 支氣管組織
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CTX大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞大鼠細(xì)胞系1×106CTX-TNA2大鼠腦I型星形膠質(zhì)細(xì)胞大鼠細(xì)胞系1×106DI TNC1大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞大鼠細(xì)胞系1×106H4-II-E-C3 大鼠肝癌細(xì)胞大鼠細(xì)胞系1×106H9C2大鼠心肌細(xì)胞大鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

支氣管組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自支氣管組織,;支氣管(Bronchi),,是指由支氣管分出的各級(jí)分枝,由支氣管分出的一級(jí)支氣管,,即左,、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,,前者較細(xì)長(zhǎng),,走向傾斜;后者較粗短,,走向較前者略直,,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,,而支氣管不是。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,,保持支氣管形態(tài),;②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ);③支氣管平滑肌通過(guò)分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能,。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 DEPTOR蛋白封閉多肽 小鼠嗜粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

緊密連接蛋白1抗體 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移12封閉多肽 小鼠嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒ELISA

5-羥色胺受體2B抗體 TOMM22蛋白封閉多肽 小鼠紅細(xì)胞生成(EPO)ELISA檢測(cè)試劑盒

乙?;M蛋白H1b抗體 鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白8封閉多肽 小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)elisa試劑盒

人前列腺特異性抗原單克隆抗體 泌乳封閉多肽 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒elisa

英文名稱: STAT6 異戊酰脫氫封閉多肽 小鼠Slit2檢測(cè)試劑盒elisa

磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 聚磷肌醇磷4B封閉多肽 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒

磷化雌激受體α抗體 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子18封閉多肽 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒ELISA

英文名稱: NQO1 微絲相關(guān)蛋白1封閉多肽 小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測(cè)試劑盒

脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 原鈣粘蛋白γA2封閉多肽 小鼠降鈣原(PCT)elisa試劑盒

鋅指蛋白ZBTB5抗體 核因子NFκB激活蛋白1封閉多肽 小鼠胰島自身抗體(IAA)試劑盒elisa

PSMα5單克隆抗體 磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白封閉多肽 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測(cè)試劑盒elisa

凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 叉頭蛋白H1封閉多肽 小鼠白介7(IL-7)ELISA試劑盒

英文名稱: MEKK3 NDUFB5蛋白封閉多肽 小鼠褪黑(MT)試劑盒ELISA

英文名稱: TNS4 溶質(zhì)載體家族25成員2封閉多肽 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA檢測(cè)試劑盒

色氨羥化抗體 脫氫激1封閉多肽 小鼠熱休克因子1(HSF1)elisa試劑盒

干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體 3號(hào)染色體開放閱讀框19封閉多肽 小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒elisa

阻抑/腫瘤抑制因子抗體 G蛋白通路抑制蛋白1封閉多肽 小鼠白介2受體(IL-2R)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞Bel-7405人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Bel-7405細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

Bel-7405人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Bel-7405細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BEWO細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BEWO細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

BJ人皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BJ細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

BJ人皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BJ細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

BIU-87人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BIU-87細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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