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小鼠乳腺成細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:27:27瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 乳腺組織
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLE0771小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLE0771小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLE14小鼠胚胎干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLE14小鼠胚胎干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠乳腺成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

乳腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,,淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,,一端連于胸肌筋膜,,另一端連于皮膚,,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中,。乳腺是哺乳動(dòng)物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長(zhǎng),、功能分化和退化過(guò)程的器官之一,。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,,這些纖維結(jié)締組織對(duì)乳房起固定作用,,而纖維結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成的。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的乳腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

胰腺激抗體 SDR42E1蛋白封閉多肽 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒

信號(hào)誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體 Alexa Fluor 647標(biāo)記牛血清白蛋白 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體激4抗體 鋅指蛋白365封閉多肽 人抗SS-B/La抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

白細(xì)胞介-2單克隆抗體 磷化Ephrin B封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA Kit

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體 Toll樣蛋白受體10封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒

富含亮氨重復(fù)家庭蛋白4抗體 糖尿病相關(guān)同源結(jié)構(gòu)域蛋白SIX5封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)試劑盒 ELISA

多腺苷二磷多聚PARP14抗體 酪氨磷受體相互作用蛋白Liprin α4封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒

piwi樣4蛋白抗體 突觸細(xì)胞粘附分子1封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA Kit

熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 微管蛋白特定伴侶蛋白E封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒

肝癌上調(diào)蛋白抗體 配對(duì)盒基因8封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子封閉多肽 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA檢測(cè)試劑盒

WD重復(fù)膜蛋白61抗體 冠狀病毒表面S蛋白封閉多肽 人沙眼衣原體(CT)ELISA Kit

戊型肝炎病毒ORF2抗原抗體 細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白3封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒

黑色瘤分化相關(guān)蛋白5抗體 聚合延伸因子封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)試劑盒 ELISA

線(xiàn)粒體COQ5蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄因子3封閉多肽 人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白372抗體 乳腺珠蛋白1封閉多肽 人綠膿桿菌外毒A(PEA)ELISA Kit

真核啟動(dòng)因子2β抗體 FOXL1蛋白封閉多肽 人流感病毒A(FLU A) ELISA試劑盒

囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 HHIP蛋白封閉多肽 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 ELISA
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞人毛囊成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人毛囊成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人黑色細(xì)胞英文名稱(chēng):人黑色細(xì)胞5×105不提供細(xì)胞鑒定報(bào)告

人脂肪干細(xì)胞英文名稱(chēng):人脂肪干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人軟骨細(xì)胞英文名稱(chēng):人軟骨細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人破骨細(xì)胞英文名稱(chēng):人破骨細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

人表皮干細(xì)胞英文名稱(chēng):人表皮干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人橫紋肌細(xì)胞英文名稱(chēng):人橫紋肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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