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小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 血管組織
小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 IG-24中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞倉(cāng)鼠細(xì)胞系1×106LEC-1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞倉(cāng)鼠細(xì)胞系1×106V79倉(cāng)鼠肺細(xì)胞倉(cāng)鼠細(xì)胞系1×1063D4/21豬肺泡巨噬細(xì)胞豬細(xì)胞系1×106PK-13豬腎細(xì)胞系豬細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

血管組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自血管外膜組織,;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維,。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,,當(dāng)血管受損傷時(shí),,成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力,。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,,其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

英文名稱: IDO1 原癌基因ROS1封閉多肽 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子ONECUT2抗體 醛縮C封閉多肽 小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒ELISA

6號(hào)染色體開放閱讀框64抗體 乳腺癌細(xì)胞分化因子P45封閉多肽 小鼠己糖激(HK)ELISA檢測(cè)試劑盒

胞漿磷蛋白PACSIN2抗體 黑色瘤相關(guān)抗原5封閉多肽 小鼠脫氫E1(PDHE1)elisa試劑盒

磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激抗體 程序性死亡配體1(CD274)封閉多肽 小鼠糖原合成激(GSK)試劑盒elisa

淋巴限制膜蛋白Jaw1抗體 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白13封閉多肽 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激抗體 磷化微管相關(guān)蛋白4封閉多肽 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨(u-T3)ELISA試劑盒

細(xì)胞角蛋白80抗體 碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4封閉多肽 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒ELISA

核苷結(jié)合蛋白2抗體 EPG5蛋白封閉多肽 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA檢測(cè)試劑盒

NXN蛋白抗體 氧固醇結(jié)合蛋白樣2封閉多肽 小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)elisa試劑盒

絲氨/蘇氨蛋白激Nek11抗體 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7封閉多肽 小鼠羥脯氨(Hyp)試劑盒elisa

ATP依賴RNA解旋DDX28抗體 磷化斑聯(lián)蛋白封閉多肽 小鼠骨保護(hù)配體(OPGL)檢測(cè)試劑盒elisa

激肽釋放6抗體 磷化雌激受體β封閉多肽 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

KIAA1370蛋白抗體 分離蛋白SCRN1封閉多肽 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒ELISA

單胺氧化B抗體 鋅指蛋白652封閉多肽 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA檢測(cè)試劑盒

染色盒同源物4抗體 轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK2封閉多肽 小鼠碳酐2(CA-2)elisa試劑盒

微管蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體52封閉多肽 小鼠色上皮衍生因子(PEDF)試劑盒elisa

CD34抗體 8號(hào)染色體開放閱讀框58封閉多肽 小鼠解整合樣金屬8(ADAM8)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞CCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCD841 CON細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

CCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCD841 CON細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CCRF-CEM人急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCRF-CEM細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

CCRF-CEM人急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCRF-CEM細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CEM/C1人急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CEM/C1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

CEM/C1人急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CEM/C1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CFPAC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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