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豬源性成分PCR試劑盒說明書
閱讀：114 發(fā)布時間：2021-6-10| 提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 40.1KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 114次 |
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豬源性成分PCR試劑盒說明書
樣本處理及要求：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員,。
試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）,。
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
注意事項:
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
3.請每次測定的同時做標準曲線,，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存,。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
9.不能使用過期產(chǎn)品,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2,。
表 2 每個樣品測試反應(yīng)體系配制表