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人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒說明書
閱讀：95 發(fā)布時(shí)間：2021-5-18| 提 供 商 | 上海邦景實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 35.8KB |
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人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒說明書
1,、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒快速檢測(cè)和疫病研究的需要,，本公司參照 OIE 國際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)及系統(tǒng)優(yōu)化,，開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測(cè)具有快速,、靈敏,、特異,、準(zhǔn)確,、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測(cè)等特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn),。2、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴(kuò)增試劑,，具體組成參見表 1：s
表 1：試劑盒組成（50test/盒）
組成成分 | 體積 |
樣品 DNA 提 取 液 1 樣品 DNA 提 取 液 2 | 5ml×1 管 500µl×1 管 |
核酸擴(kuò)增試劑： DEPC 水 BP PCR 反應(yīng)液 Taq 酶(5U/ul) 陰性對(duì)照 BP 陽性對(duì)照 | 5ml×1 管 750µl×1 管 40µl×1 管 1ml×1 管 1ml×1 管 |
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值,。
樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
標(biāo)記物：血清 血漿 組織勻漿等
應(yīng)用：僅用科研實(shí)驗(yàn)檢測(cè)定量，定性檢
檢測(cè)方法：夾心法
技術(shù)要求：全程按說明書步驟檢測(cè),，操作規(guī)范,，專業(yè),，儀器設(shè)備齊全。
規(guī)格：48t/96t
性狀：液體
運(yùn)輸方式：快遞發(fā)貨
有效期：6個(gè)月品
特點(diǎn)：靈敏性高,，---性,，吸附均勻,，吸附性好，回收利用率高,，是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。
使用范圍：此產(chǎn)品供科研實(shí)驗(yàn)使用,，不得用于---,。
用途：用于測(cè)定人血清,、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性,。
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值）,，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定,，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5.底物請(qǐng)避光保存,。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.不能使用過期產(chǎn)品,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn)。
每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制見下表 2,。
表 2 每個(gè)樣品測(cè)試反應(yīng)體系配制表
試劑 | PCR 反應(yīng)液 | Taq 酶 | 合計(jì) |
用量 | 14.5 μL | 0.5μL | 15μL |
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類熒光定量檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求：
1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè),。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測(cè),，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注：本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員,。