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TSZ elisa試劑盒實驗原理

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TSZ elisa試劑盒實驗原理

采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠補體片段3c捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。

樣本處理及要求

1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。

2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。

3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融,。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

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