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小鼠性鼻炎波氏桿菌酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

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小鼠性鼻炎波氏桿菌酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1.操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,,本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
4.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存,。
6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),,使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為630nm
7.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個(gè)月

小鼠性鼻炎波氏桿菌酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3,。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

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