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微生物實(shí)驗(yàn)室滅菌方法匯總
閱讀:339 發(fā)布時(shí)間:2024-11-18微生物實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行微生物研究的場所,,對(duì)環(huán)境要求很高,,應(yīng)該保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的環(huán)境潔凈安全,嚴(yán)格的消毒滅菌工作非常重要,,影響著實(shí)驗(yàn)室順利研究實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,,同時(shí)嚴(yán)格的消毒滅菌也為實(shí)驗(yàn)室工作人員提供一個(gè)清潔而良好的工作環(huán)境。
目前,,常用的消毒滅菌方法多采用物理方法(如,,干熱滅菌法、濕熱滅菌法,、過濾除菌法,、射線殺菌法等)和化學(xué)方法兩大類。
1.干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120℃-150℃的高熱,,并保持90-120分鐘,,殺死細(xì)菌和芽孢,達(dá)到滅菌目的的一種方法,。
主要適用于不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿,、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥,,易于貯存,。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一,在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時(shí),,常須利用工作臺(tái)面上的酒精燈火焰對(duì)金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補(bǔ)充滅菌,。
2.濕熱滅菌法
壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前蕞常見的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力,,使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡,。
適合于布類工作衣、各種器皿,、金屬器械,、膠塞、蒸餾水,、棉塞,、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調(diào)整為1.0-1.1 kg/cm2,,維持20-30min即可達(dá)到滅菌效果,。
3.過濾除菌法
是將液體或氣體通過有微孔的濾膜過濾,,使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留,從而達(dá)到除菌的方法,。過濾除菌法大多用于遇熱易發(fā)生分解,、變性而失效的試劑、酶液,、血清,、培養(yǎng)液等。
目前,,常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過濾除菌,,或用玻璃細(xì)菌濾器、濾球負(fù)壓過濾除菌,。濾膜孔徑應(yīng)在0.22-0.45μm范圍內(nèi)或用更小的細(xì)菌濾膜,,溶液通過濾膜后,細(xì)菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻,,并利用濾膜的吸附作用,,阻制小于濾膜孔徑的細(xì)菌透過。
4.射線滅菌法
利用紫外線燈進(jìn)行照射滅菌的方法,。紫外線是一種低能量的電磁輻射,可以殺滅多種微生物,。紫外線的作用機(jī)制是通過對(duì)微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活,。
適合于實(shí)驗(yàn)室空氣、地面,、操作臺(tái)面滅菌,。滅菌時(shí)間為30min。用紫外線殺菌時(shí)應(yīng)注意,,不能邊照射邊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,,因?yàn)樽贤饩€不僅對(duì)人體皮膚有傷害,而且對(duì)培養(yǎng)物及一些試劑等也會(huì)產(chǎn)生不良影響,。
5.化學(xué)消毒劑消毒法
化學(xué)消毒劑使用范圍比較廣泛,,可用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣,、工作面,、操作者皮膚、某些實(shí)驗(yàn)器皿等,。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛,、高錳酸鉀、70%-75%乙醇,、過氧乙酸,、新潔爾滅,、環(huán)氧乙烷、以及過氧化氫等,。但是普通的化學(xué)消毒劑有殘留和腐蝕性,,在使用時(shí)應(yīng)注意安全,特別是用在皮膚或?qū)嶒?yàn)材料上的消毒劑,,須選用合適的藥劑種類,、濃度和處理時(shí)間,才能達(dá)到安全和滅菌的目的,。而目前*食品級(jí)過氧化氫消毒劑具有安全綠色無殘留的特點(diǎn),,可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的滅菌,同時(shí)搭配過氧化氫干霧滅菌器可以對(duì)無菌室和培養(yǎng)室的空氣消毒,。
微生物實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)潔凈度要求很高的環(huán)境,,對(duì)于微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基,、被污染和接種的培養(yǎng)物等,,應(yīng)該經(jīng)滅菌后方能使用。