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       血清,，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿,。

      血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用主要有以下幾點(diǎn)：

　　1. 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，特別是基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，還包括一些主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,；

　　2. 提供結(jié)合蛋白,，能識(shí)別維生素、脂類,、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；

　　3. 血清中含有一些微量元素,，有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用；

　　4. 細(xì)胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,；

　　5. 血清蛋白形成了血清的粘度,，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),，粘度起到重要作用,；

　　6. 抑制蛋白酶的作用，在貼壁細(xì)胞傳代時(shí)可將剩余胰蛋白酶失活,，從而保護(hù)細(xì)胞,。

　　雖然我們對(duì)血清的功能清楚，但血清的成份非常復(fù)雜,，時(shí)至今日對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子,、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),；其次血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年,，因此,，要保證每批血清的相似性極為困難，在細(xì)胞培養(yǎng)中避免不了要做血清篩選,，那如何篩選血清呢,？

　　先來(lái)了解一下我們常用的血清。

　　目前Hyclone ,、Gibico,、Biowest、Life-iLab,、Gemini等品牌血源用戶相對(duì)較多,，可信度較高。但由于血清產(chǎn)品的特殊性,，同一品牌的血清不同批次的血清也會(huì)有很大差異,。

　　血清的種類：現(xiàn)常用血清主要是牛血清、人血清,、馬血清等,。其中牛血清來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟,、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解,，故而是常用的血清。牛血清有小牛血清,、新牛血清,、胎牛血清。胎牛血清是品質(zhì)高的,，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界,，血清中所含的抗體,、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。

　　血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

　　1. 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml

　　2. 總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,，數(shù)值偏高偏低都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行

　　3. 血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl

　　4. pH。國(guó)產(chǎn)血清,、大多高于7.5,，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5,，根據(jù)PH的高低可用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源

　　5. 微生物,。包括細(xì)菌、霉菌,、支原體,、噬菌體、各類病原性病毒等,，大多都能清除,。大腸桿菌噬菌體無(wú)法過(guò)濾，很難清除,，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒，在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,，是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要原因之一

　　在實(shí)際篩選時(shí),，主要從血清外觀和實(shí)驗(yàn)操作時(shí)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行。

　　從外觀上：

　　1. 顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同,，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,，因?yàn)樘ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂；

　　2. 澄清度：高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,，表現(xiàn)為稀薄,、清淡；

　　3. 血清沉淀：血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有影響,，沉淀的產(chǎn)生原因跟加工生產(chǎn)方式、是否反復(fù)凍融密切相關(guān),，在實(shí)驗(yàn)操作中可能會(huì)對(duì)細(xì)胞觀察產(chǎn)生影響,。

　　從性能上：

　　1. 細(xì)胞形態(tài)，在進(jìn)行血清篩選時(shí)首先觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)是否產(chǎn)生明顯變化,，以及觀察貼壁細(xì)胞的貼壁情況,，細(xì)胞在不同血清培養(yǎng)中可能會(huì)出現(xiàn)形態(tài)上的差異,；

　　2. 倍增時(shí)間，一般情況下會(huì)選擇倍增時(shí)間短的血清,，值得注意的是血清的影響會(huì)傳至5代,，在進(jìn)行測(cè)試時(shí)，最好培養(yǎng)五代后進(jìn)行計(jì)倍增時(shí)間的計(jì)算,；

　　3. 克隆形成率,，測(cè)試時(shí)一般選50、100,、200個(gè)細(xì)胞進(jìn)行平板克隆測(cè)試,，平均5d左右換一次液，兩周后染色計(jì)數(shù),，對(duì)比克隆形成情況,。