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原代培養(yǎng)技術(shù)的重點(diǎn)關(guān)注事項(xiàng)
閱讀:193 發(fā)布時間:2024-1-8原代培養(yǎng):字面意思即第1次培養(yǎng),,但實(shí)際上,通常把第1代至第10代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。 原代培養(yǎng)技術(shù)的重點(diǎn)關(guān)注事項(xiàng):
一、注意污染
1,、嚴(yán)格進(jìn)行動物皮膚消毒,,使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒,,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒,。2、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,,防止細(xì)菌,、霉菌、支原體污染,,避免化學(xué)物質(zhì)污染,。自取材開始,保持所有組織細(xì)胞處于無菌條件,。細(xì)胞計(jì)數(shù)可在有菌環(huán)境中進(jìn)行,。
3、吸取液體前,,瓶口和吸管進(jìn)行火焰消毒,;吸取液體時,避免瓶口和吸管碰撞,。
4,、離心管入臺前,管口,、管壁應(yīng)消毒,。
5、實(shí)驗(yàn)者離開超凈臺時,,要隨時用肘部關(guān)閉工作窗,。
6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后,,移入另一個器皿中繼續(xù)消毒,在浸泡器械時剪刀口要叉開放,,鑷子彎頭要向下放,,并加蓋消毒。凡在超凈臺外操作的步驟,,各器皿需用蓋子或橡皮塞,,以防止細(xì)菌落入。
二,、器材使用時既要注意用火焰消毒,,又要防止?fàn)C傷,、燙死細(xì)胞。經(jīng)火焰消毒后的吸管一定要用Hanks液冷卻,。
三,、超凈臺內(nèi)溫度、濕度較大,,在夏天工作時臺內(nèi)散熱更慢,,因此進(jìn)行細(xì)胞懸液混勻、接種時,,離火焰要稍微遠(yuǎn)些,,組織細(xì)胞、培養(yǎng)液等不能暴露過久,,以免溶液蒸發(fā),。