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 ELISA原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理,，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法,，酶聯(lián)免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種,，分三個部分組成：免疫識別,，信號輸出和數(shù)據(jù)處理,。標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到ELISA實驗的結(jié)果，甚至是關(guān)系到實驗的成敗,。那么在ELISA實驗中,，這一方面該如何處理呢？下面對ELISA實驗標(biāo)準(zhǔn)曲線的技術(shù)解答內(nèi)容：

    1.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限,。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi),。

    2.采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

    3.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。

    4.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說,，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗,，至少要0.99甚至是0.999,。

    6.檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行,，以減少高濃度對低濃度的影響,，提高準(zhǔn)確性。

    7.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點,，但至少要保證有5個點,。

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方法：

    標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度得到后，可通過計算器,、Excell或SPSS統(tǒng)計軟件進行繪制,，并得到相關(guān)的回歸方程（即計算公式）和相關(guān)系數(shù)（回歸系數(shù)）。Excell軟件比較好用一些,；SPSS也行,，不過是英文的，初學(xué)者不是很容易掌握,；計算器嘛太麻煩了,，所以現(xiàn)在一般不用。