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支原體細(xì)胞污染是最麻煩的，通常來(lái)源有這幾個(gè)：

1、已受污染的細(xì)胞

2,、操作人員的疏失

3,、已受污染的培養(yǎng)基,、血清

4、操作環(huán)境不良,、實(shí)驗(yàn)器具不潔等,。由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實(shí)驗(yàn)室之操作人員的污染亦可能為污染源,，須十分注意,。而萬(wàn)一細(xì)胞已受支原體污染時(shí)，最佳的處理原則為將細(xì)胞高壓滅菌后丟棄,，以免污染其它潔凈的細(xì)胞株,。

支原體污染細(xì)胞后，必須要清除支原體,，清除方案有以下：

1,、對(duì)于非重要的細(xì)胞，如培養(yǎng)中的細(xì)胞,、WCB的細(xì)胞等,，將培養(yǎng)物與用過(guò)的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。對(duì)于較為重要的細(xì)胞,，如來(lái)源珍貴或?qū)嶒?yàn)室中細(xì)胞保藏量較小等可以采用以下（2）-（8）的方法,。

2、用MRA處理：用支原體清除劑（Mycoplasma Removal Agent）處理細(xì)胞,，作用濃度為 25μg/ml,，兩周可以清除支原體。

3,、用清洗純化法清除支原體污染的方法：細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)馴化→優(yōu)質(zhì)細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌,，其原理是利用離心力、細(xì)胞,、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的,。由于支原體個(gè)體小且除發(fā)酵支原體外多為細(xì)胞外寄生,所以通過(guò)反復(fù)洗滌細(xì)胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低至ji 限. 如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用,，可達(dá)到更好的效果。

4,、藥物輔助加溫處理：先用藥物處理后,，再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時(shí)，可殺死支原體,，但對(duì)細(xì)胞有不良影響,。

5、使用支原體特異性血清：用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,，因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng),，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個(gè)月后仍為陰性,。

6,、動(dòng)物體內(nèi)接種除菌法：把受支原體污染的腫瘤細(xì)胞接種在同種動(dòng)物皮下或腹腔中，借動(dòng)物免疫系統(tǒng)消滅支原體,，而腫瘤細(xì)胞卻能在體內(nèi)繼續(xù)生長(zhǎng),，待一定時(shí)間后，從體內(nèi)取出細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)繁殖,。

7,、巨噬細(xì)胞吞噬法：從動(dòng)物腹腔采取巨噬細(xì)胞，為排除其它細(xì)胞成分,，可先進(jìn)行純化,，然后再加入被支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)液中混合培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中,，為檢查支原體是否已被消除干凈,，可利用支持物培養(yǎng)法驗(yàn)證，取出支持物逐日染色,、鏡檢觀察,，至支原體已被消除干凈為止。

8,、使用支原體清除培養(yǎng)基,，每2~3天更換1次新鮮培養(yǎng)液，換液時(shí)用無(wú)菌的平衡鹽溶ye洗滌細(xì)胞1~2次,；期間如果細(xì)胞密度過(guò)大,，請(qǐng)保持細(xì)胞密度適當(dāng)（貼壁細(xì)胞可能需要用yi 酶消化），并更換新的培養(yǎng)器皿,，3天之后,，即可見(jiàn)明顯清除效果；處理15天后,，可以用支原體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè),，檢測(cè)支原體是否殺滅*,；如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理6天,；為避免細(xì)胞再次受到“支原體"的污染,，以后每隔1個(gè)月進(jìn)行支原體的常規(guī)檢測(cè)，以保證沒(méi)有新的支原體污染,。

注：支原體污染時(shí)細(xì)胞表現(xiàn)為長(zhǎng)得不好,，也不死亡，同時(shí),，培養(yǎng)基又是清亮的,，時(shí)間長(zhǎng)達(dá)一周也沒(méi)有什么變化，這時(shí)基本上可以判斷出是支原體污染了,。