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ELISA試劑盒試驗常見問題解析
閱讀:197 發(fā)布時間:2023-4-20ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,,有可能導致顯色不全、花板等結果,。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質量,。
ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因及解決辦法分析:
1,、選擇試劑
選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。
2、加樣可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣,;
2)手工操作中,,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);
3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外,。
ELISA試劑盒解決辦法:
1) 標本為血清:最好將血液先自然存放1-2小時后,,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘,;若在幾天內檢測,,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,,則置于-20℃的低溫冰箱內,。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干,。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,,請分批操作,。
3 孵育可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),,吸附于孔壁,,難于清洗徹di;
2) 孵育時間人為延長,,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,,難以清洗徹di。