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相較于其他類型的ELISA實驗,，直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快,，不需要用到二抗,，避免了交叉反應，檢測結(jié)果不容易出錯,，但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的,，樣本中的靶蛋白及其他雜質(zhì)蛋白都會與ELISA版結(jié)合，實驗背景會比較高,，而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準備能夠與其特異性結(jié)合的一抗,，實驗不太靈活。另外由于沒有使用二抗,，信號沒有被放大,，降低了測定的靈敏度。

將抗原固定于ELISA班上,，隨后分兩步進行檢測：首先加入檢測抗體于抗原特異性結(jié)合,，隨后加入酶標二抗檢測并利用底物顯色。

于直接ELISA相比,，間接ELISA用到酶標二抗,，具有更高的靈敏度，也需要更少的標記抗體,，更經(jīng)濟,，間接ELISA還提供了更大的靈活性，

缺點：存在交叉反應的可能性（酶標二抗直接與抗原結(jié)合）,，可能會增加背景,，同時與直接ELISA相比,，間接ELISA實驗多了二抗孵育的步驟，實驗周期延長,。

競爭ELISA相對以上的三種方法更復雜一些，但以上三種ELISA類型都適用于競爭ELISA的形式,，其主要有點在于可檢測不純的樣品,，且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性高，但存在整體敏感性和專一性較差的問題,。