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解讀ELISA試劑盒中的抗體
閱讀:283 發(fā)布時間:2023-1-10在ELISA試劑盒中運用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗),。
多抗取白免疫動物的抗血清,,制備較簡略,,但抗血清成分凌亂,,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,,還含有多種其他抗體,,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,,批間差異較大,。而單抗僅針對抗體的單一表位,ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高,,且制備技能老練,,產(chǎn)量大,批間差異小,,但結(jié)合位點的單一也正是其缺陷之地址,,在雙抗體夾心法中,,如包被和指示抗體運用同一單抗,則由于結(jié)合位點的短少,,簡略構(gòu)成假陰性成果,。在運用雙單抗一步法時,應(yīng)留意抗原過剩時的“鉤狀效應(yīng)",。
在ELISA試劑盒中運用的抗原要求有較高的特異性,、親和力和純度。主要有3類,,即天然抗原,、人工組成抗原和基因重組抗原。天然抗原的純度不高,,特異性不強,;組成抗原一般為多肽片段,短少天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,,親和力不高,,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全,、特異性強,、親和力高、產(chǎn)量大等特征,,是一種比較志向,,但其純化比較困難。