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細胞生長緩慢的常見原因:

1,、培養(yǎng)基可能缺乏細胞生長所需的某種因子,。
通常情況下,，當小伙伴購買細胞,，并沒有按照ATCC或國內(nèi)細胞庫推薦的方法制備培養(yǎng)基，使用實驗室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養(yǎng)基,，或直接購買培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。

2,、細菌,、支原體、真菌等污染:雖然培養(yǎng)基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素),，但如果無菌操作觀念不強,，仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞,，可以丟棄污染細胞,。當然，丟棄并不是隨意的,，扔進垃圾桶,。應按照實驗室生物安全規(guī)定進行。然后復蘇培養(yǎng)物,，建議培養(yǎng)箱*消毒,。

如果不冷凍，而且這種細胞非常珍貴,，常用的治療方法是藥物治療:細菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌藥物;支原體污染再加上抗支原體藥物,，具體藥物可以咨詢技術(shù)支持，他們會更加專業(yè),。

3,、許多細胞的生長依賴于密度。如果傳代后細胞密度過小,，也會影響細胞生長,。這段時間沒有什么特別好的，就是更換液體,。如果細胞培養(yǎng)瓶為T75,，則可以消化,、離心、復蘇,，然后接種到T25瓶中,。

4、冷凍細胞中添加DMSO(二甲基亞砜)的量不正確,，沒有逐漸梯度冷卻,。下一次恢復后的細胞總是壞的。處理方法:按推薦的冷凍保存方法制備冷凍液,。部分細胞適合10% DMSO，部分細胞適合5% DMSO;嚴格遵循漸變冷卻的原則,，細胞恢復后迅速解凍,。

5、換液間隔時間太長,。一些小伙伴真的把細胞“佛"系生長,。當他們想到它的時候，才會換下液體,，相信一個句子,。“你已經(jīng)是一個成熟的細胞了,。你應該學會養(yǎng)活自己,，成長"。在這種情況下,，細胞培養(yǎng)瓶中積累了大量的細胞代謝廢物,，影響細胞活性。推薦:勤奮點

6,、細胞的“消化"時間不宜過長,，減少對細胞的損傷;此外，EDTA一般添加到胰腺酶中,，螯合鈣離子,，影響細胞粘附。治療方法:控制細胞“消化"時間,，盡量去除干凈的胰蛋白酶和EDTA,。

PH值: 細胞需要在一定的PH值下生長，這個小朋友知道,。但是很多時候PH值是我們忽略的東西,，這也是想強調(diào)的一點。隨著使用時間的增加,，我們使用的介質(zhì)可能會慢慢變成堿性!(當然,，它也可能變酸，但改變堿是常見的)。一般來說,，過堿的培養(yǎng)基會影響細胞的生長,。治療:簡單的方法就是更換新鮮的培養(yǎng)基!當然，如果你有時間和條件,，你可以調(diào)整介質(zhì)的pH值,。