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1,、直接ELISA

將抗原固定于ELISA板上,，然后用酶標抗體直檢測抗原,。
相較于其它類型的ELISA實驗,，直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快,，不需要用到二抗,，避免了交叉反應(yīng)，測定結(jié)果不容易出錯,。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的,，樣本中的靶蛋白及其他雜質(zhì)蛋白都會與ELISA板結(jié)合，實驗背景會比較高,。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準備能夠與其特異性結(jié)合的一抗,，實驗不太靈活。另外由于沒有使用二抗,，信號沒有被放大,，降低了測定的靈敏度。

2,、間接ELISA
先將抗原結(jié)合到ELISA板上,，隨后分兩步進行檢測：首先加入檢測抗體與抗原特異性結(jié)合,，隨后加入酶標二抗檢測并利用底物顯色。
與直接ELISA相比,，間接ELISA用到酶標二抗,，具有更高的靈敏度，也需要更少的標記抗體,，更經(jīng)濟,。間接ELISA還提供了更大的靈活性，因為不同的一抗能夠與單一標記的二抗一同使用,。間接ELISA實驗的缺點是存在交叉反應(yīng)的可能性（酶標二抗直接與抗原結(jié)合）,，可能會增加背景，同時與直接ELISA相比,，間接ELISA實驗多了二抗孵育的步驟,，實驗周期延長。

3,、夾心ELISA
先將捕獲抗體固定于ELISA板孔中,，然后加入樣品，接著加入檢測抗體,。如果檢測抗體是酶標抗體,，則可稱為直接夾心ELISA；如果檢測抗體不帶有標記,，則還需要使用酶標二抗與檢測抗體結(jié)合,，這種稱為間接夾心ELISA。
夾心ELISA的靈敏度高,，它比直接或間接ELISA敏感2-5倍,；同時夾心ELISA使用兩種特異性抗體與抗原結(jié)合，擁有很高的特異性,。另外夾心ELISA能夠通過直接或間接的方式進行檢測,，靈活性較高。夾心ELISA的缺點是對配對抗體要求很高,，如果沒有標準化的試劑盒或者已經(jīng)通過測試的配對抗體,，則需要進行配對抗體定制并進行優(yōu)化，因為降低捕獲抗體與檢測抗體之間的交叉反應(yīng)是非常重要的,。

4、競爭ELISA法
預(yù)先將抗原包被在固相載體上,，并加入酶標記的特異性抗體,。實驗時，加入待檢抗原（或抗體）,，如果待檢物是抗原,，則待檢抗原與預(yù)先包被在固相載體上的抗原競爭結(jié)合酶標抗體,；如果待檢測物是抗體，則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標抗體競爭結(jié)合包被在固相載體上的抗原,。通過洗滌洗掉被競爭結(jié)合的酶標抗體,，最后加底物顯色。需要注意的是顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成反比,。
競爭ELISA相對以上介紹的三種方法更復(fù)雜一些,，但以上三種ELISA類型都適用于競爭ELISA的形式。其主要優(yōu)點在于可檢測不純的樣品,，且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性高,，但存在整體敏感性和專一性較差的問題