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蛋白定量的方法有很多種，應用較多的主要有兩種：

BCA蛋白定量檢測法和Bradford蛋白定量檢測法,，市售的蛋白定量試劑盒也多基于上述兩種檢測方法而開發(fā)的。兩種方法均需配制蛋白標準品，蛋白與定量試劑經(jīng)過一定時間的反應（BCA法反應為37℃,、20-30min，Bradford法反應一般為37℃,，5min）,，酶標儀讀取樣品的OD值，繪制的蛋白標準曲線,，依據(jù)標準曲線計算WB蛋白的濃度,。兩種檢測方法相比BCA法，Bradford法不僅節(jié)省反應時間,，也無需配置反應試劑,，簡單、快速,、好用,，推薦Bradford法測定蛋白濃度。

嚴格來說,，每次的蛋白濃度測定均需配制新鮮蛋白標準品,，保證每次測到的蛋白濃度的準確性。然而,，WB法評估蛋白表達水平本身就是一種半定量或者相對定量,，因此在實際蛋白樣本準本及濃度測定時只需保證均一性即可，即使用同樣的標準曲線計算同一批蛋白的濃度,，如果計算準備即可保證蛋白上樣時內(nèi)參水平基本一致,。因此，在實際操作中我們只需測定一次標準品的OD值,、繪制標準曲線,，即可用此曲線來計算后續(xù)實驗蛋白的濃度，節(jié)省時間和試劑,。