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單克隆抗體的制備和凍存：

篩選出的陽性細胞株應(yīng)及早進行抗體制備,，因為融合細胞隨培養(yǎng)時間延長，發(fā)生污染,、染包體丟失和細胞死亡的機率增加,。抗體制備有兩種方法,。一是增量培養(yǎng)法,，即將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體,。該法需用特殊的儀器設(shè)備,，一般應(yīng)用無血清培養(yǎng)基，以利于單克隆抗體的濃縮和純化,。*普遍采用的是小鼠腹腔接種法,。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠，先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射,，一周后將雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔中去,。通常在接種一周后即有明顯的腹水產(chǎn)生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水,，有時甚至超過40ml,。該法制備的腹水抗體含量高,，每毫升可達數(shù)毫克甚至數(shù)十毫克水平。此外,，腹水中的雜蛋白也較少,，便于抗體的純化。接種細胞的數(shù)量應(yīng)適當,，一般為5×105/鼠,，可根據(jù)腹水生長情況適當增減。

選出的陽性細胞株應(yīng)及早凍存,。凍存的溫度越低越好,，凍存于液氮的細胞株活性僅有輕微的降低，而凍存在－70℃冰箱則活性改變較快,。細胞不同于菌種,，凍存過程中需格外小心。二甲亞砜（DMSO）是普遍應(yīng)用的凍存保護劑,。凍存細胞復(fù)蘇后的活性多在50％～95％之間,。如果低于50％，則說明凍存復(fù)蘇過程有問題.

單克隆抗體的純化：

單克隆抗體的純化方法同多克隆抗體的純化,，腹水特異性抗體的濃度較抗血清中的多克隆抗體高,，純化效果好。按所要求的純度不同采用相應(yīng)的純化方法,。一般采用鹽析,、凝膠過濾和離子交換層析等步驟達到純化目的，也有采用較簡單的酸沉淀方法,。目前有效的單克隆抗體純化方法為親和純化法,，多用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠球蛋白抗體與載體（*常用Sepharose）交聯(lián)，制備親和層析柱將抗體結(jié)合后洗脫,，回收率可達90％以上,。蛋白可與IgG1、IgG2a,、IgG2b和IgG3結(jié)合,，同時還結(jié)合少量的IgM。洗脫液中的抗體濃度可用紫外光吸收法粗測,，小鼠IgG單克隆抗體溶液在A280nm時,，1.44（吸光單位）相當于1mg/ml。經(jīng)低pH洗脫后在收集管內(nèi)預(yù)置中和液或速加中和液對保持純化抗體的活性至關(guān)重要,。