技術(shù)文章
簡述ELISA基本原理
閱讀:1170 發(fā)布時間:2021-11-29酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù),。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速,、靈敏,、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點,。
基本原理它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定,。測定的對象可以是抗體也可以是抗原,。
在這種測定方法中有3種必要的試劑:
1、固相的抗原或抗體(免疫吸附劑)
2,、酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)
3,、酶作用的底物(顯色劑)測量時,,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),,此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,,再加上酶的相應(yīng)底物,,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比,。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼,、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,,也可以用分光光度計(酶標(biāo)儀)加以測定,。其方法簡單,方便迅速,,特異性強,。