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科研工作離不開抗體,，WB、IP,、IHC,、IF、ChIP和FC都需要用到抗體,，那么這幾種實驗技術都需要什么樣的抗體呢,？

1.WB

WB的蛋白經(jīng)過加熱變性之后都變成線性的結(jié)構(gòu)。因此*好的抗體是采用非常特異序列的人工合成多肽的方法來做實驗,，結(jié)果也非常特異,。

2.IP/CHIP

我們用抗體去結(jié)合生理狀態(tài)下的蛋白質(zhì)，因此IP的抗體最好使用純化的天然蛋白制作的抗體來做,，也可以用純化的重組蛋白的抗體,。最好不要用人工合成多肽制作的抗體，因為這種抗體識別的位點可能被深深地藏在了蛋白的內(nèi)心深處,。CHIP和IP沒有太大的區(qū)別,，唯 yi 的問題在于，如果抗體識別的表位和該蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的部位一致,，則會導致CHIP實驗的失敗,。

3. IF/IHC

免疫熒光和免疫組化中需要進行固定一步，固定是為了盡量讓細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)維持和原有的一致,。這種化學物質(zhì)的固定使蛋白質(zhì)變性凝固,，與天然狀態(tài)下的蛋白質(zhì)有了一定的區(qū)別，但是又不同WB中加熱變性變成了線性的結(jié)構(gòu),。因此在做IF/IHC實驗中,，最合適的抗體可以是純化的重組蛋白得到的抗體，也可以是人工合成多肽得到的抗體（多肽是在蛋白質(zhì)的表面）

4.FC

流式細胞中分為兩種,，一種是活細胞的流式,，這種流失最好采用是天然蛋白或者重組蛋白的抗體來做，另外一種是經(jīng)過固定之后的流式,，和IF/IHC 所用抗體一致,。 在做流式細胞中，我們有直接標記和間接標記,，間接標記不如直接標記真實準確,。因此我們選擇流式抗體要采用帶有熒光標記的抗體；如果研究的蛋白沒有直接標記的抗體,，那么就采用間接標記抗體,，需要添加熒光二抗。