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三種常見抗體保存方法
閱讀:892 發(fā)布時間:2021-9-2抗體由于性質(zhì)和所使用的儲存條件等各有不同,其保質(zhì)期可能從幾周到幾年,??贵w能否正確保存,直接決定了抗體的活性和使用效果,。每個抗體有其*的保存最佳條件,,但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準(zhǔn)則以及一些注意事項??贵w必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍,。為了維持蛋白質(zhì)的活性,以及防止其聚集,,經(jīng)常保存在一定濃度的甘油,,蔗糖,或類似的物質(zhì)里面,。如果抗體保存得當(dāng),,大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。
(1)多克隆抗體
多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大,。然而,,一旦抗體被純化后,儲存在50%的甘油中于-20℃保存,,即使沒有凍融,,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢,。即使沒有甘油,,只要你不經(jīng)常凍融,抗體也可以存儲在-20℃幾年甚至幾十年,。此外,,該抗體濃度應(yīng)高于1mg/ml,因為稀的抗體容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失,。
(2)單克隆抗體
單克隆抗體可以加入50%的甘油存放于-20℃,。也可4℃或-20℃保存于飽和硫酸銨中。一般不會出現(xiàn)失活,、細(xì)菌滋生以及氧化等現(xiàn)象,。而凍干法(冷凍干燥,干燥或從冰凍狀態(tài))為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法,。在大多數(shù)情況下,,凍干的抗體最好是存放在-20℃。但凍干法需要昂貴的設(shè)備和勞動力。
(3)帶標(biāo)記的抗體
帶標(biāo)記的抗體一般儲存在黑色容器中或者用錫箔紙包裹,。
①酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對于冷凍特別敏感,,一般應(yīng)在4°C短期存儲。標(biāo)記抗體長期保存最好是在終濃度為50%的甘油或乙二醇中于-20°C保存,。雖然某些酶結(jié)合物可在無保護(hù)劑的情況下于-20°C儲存,,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融,。
②熒光標(biāo)記抗體
熒光遇光容易分解,,熒光標(biāo)記的試劑(不只是抗體)必須避光保存,其應(yīng)該存放在4°C,,避免讓其凝固,。