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小鼠elisa試劑盒樣品收集方法
閱讀:118 發(fā)布時間:2021-4-21小鼠elisa試劑盒樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,,無內(nèi)毒素試管,。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,。避免使用溶血,,高血脂樣品,。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測,。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除,。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,,若不能及時檢測,,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),,或-80℃(6個月內(nèi)檢測),,避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品高值,,請根據(jù)實際情況,,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù)),。
小鼠elisa試劑盒產(chǎn)品性能:
1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,,大于等于0.9900。
2.靈敏度:低檢測濃度小于10 pg/ml,。
3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應,。
4.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。