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1.直接法（direct ELISA）
將抗原直接固定在固相載體上,，加入酶標記的一級抗體,，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要,。
優(yōu)勢：操作手續(xù)簡短,，因無須使用二抗可避免交互反應。
缺點：試驗中的一抗都得用酶標記,，但不是每種抗體都適合做標記,，費用相對提高。
 
2.間接法（indirect ELISA）
此測定方法與直接法類似,，差別在于一級抗體沒有酶標記,，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢：二抗可以加強信號,，而且有多種選擇能做不同的測定分析,。不加酶標記的一級抗體則能保留它多的免疫反應性。
缺點：交互反應發(fā)生的機率較高,。
 
3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA）
被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,，其中一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體,。另一個則是檢測抗體,，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量；或不標記,，再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量,。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位,。
優(yōu)勢：高靈敏,、高專一性，抗原無須事先純化,。
缺點：抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位,。
 
4.競爭法（competitive ELISA）
樣本里的抗原（自由抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一起競爭相同的抗體，當樣品里的自由抗原越多,，就可以結合越多的抗體,，而固定抗原就只能結合到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清洗步驟,，洗去自由抗原和抗體的復合物,，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只有固定抗原的對照組結果相比較,，根據(jù)呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量,。
優(yōu)勢：可適用比較不純的樣本，而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高,。