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技術(shù)文章

牛elisa試劑盒原理及特點

閱讀:322          發(fā)布時間:2021-2-8

原理:

    采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平,。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,制成固相載體,,實驗時依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品,,并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體,標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合,。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,再用硫酸終止反應(yīng),,轉(zhuǎn)變成黃色,。標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,,顏色越淺,。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負(fù)相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,,計算測試樣品中OXLDL濃度。

注意事項:

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。

5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。

6. 底物請避光保存,。

7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9. 本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn),。

特點:

專一性強(qiáng):抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),,而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),,使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,,因此,,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,,大大提高了檢測的靈敏性,,使檢測水平接近放射免疫測定法。
樣品易保存:經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,,因此有利于樣品的保存,。另外我公司歡迎客戶來樣待測,可從標(biāo)本收集,、保存,、預(yù)試驗、實驗,、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo),,更多詳細(xì)信息敬請來電!

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