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人elisa試劑盒實驗原理：

將目標抗體包被于微孔板中,，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本,，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物素抗體洗凈后,，加入HRP標記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值）,，計算樣品濃度。

人elisa試劑盒操作程序：

    1. 棄去液體，甩干,，每孔加滿稀釋后洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。如此重復5次，拍干,。

    2. 每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘,。。

    3. 取出酶標板,，每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

    4.測定：以空白孔調零,，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

    5.根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的,，其實際濃度應該乘以總稀釋倍數(shù),。

人elisa試劑盒樣本處理及要求

    1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。

    2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。

    3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。

    注：標本溶血會影響后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。