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小鼠elisa試劑盒原理：

 本小鼠elisa試劑盒系由預(yù)包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清,、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后,；再加入酶標(biāo)記物,，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液,，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后,，產(chǎn)物變?yōu)辄S色,；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體,。

小鼠elisa試劑盒操作注意：

1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,，務(wù)必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA試劑盒說明書嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.

2.若不同批號小鼠elisa試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),，或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形,。

3.反應(yīng)時間的誤差,，做大量標(biāo)本時，一孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大,。

4.臨界值附近標(biāo)本波動為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免,?？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

5.加樣時樣品量誤差,，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,，但對閾值附近的標(biāo)本影響，建議校對加樣器,。

小鼠elisa試劑盒樣本處理及要求：

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融,。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

注：標(biāo)本溶血會影響*后檢測結(jié)果,，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。