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技術(shù)文章

elisa試劑盒原理與成分

閱讀:641          發(fā)布時間:2020-11-11

elisa試劑盒原理:
       
        
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體elisa試劑盒之間的特異結(jié)合反應(yīng),,所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,,如抗原抗體,,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn),。
 

elisa試劑盒成分:

1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組elisa試劑盒-6 0.5mL x 2

4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實(shí)驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

elisa試劑盒注意事項:


1.elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn)。 

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