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豬elisa試劑盒原理：

免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),，所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用得到的,，而抗原豬elisa試劑盒或抗體的如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn),。

豬elisa試劑盒處理和保存：

1,、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中,。

2,、 采血后室溫靜置1小時(shí)。

3,、 將采集血液用離心機(jī)4℃,，2500rpm離心10min，,，將離心好的勻漿留上清,，棄下面沉淀。

4,、 取上清,。 分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,，取適量上清夜進(jìn)行各種豬elisa試劑盒,。  

豬elisa試劑盒操作方法?：

雙抗體夾心法：

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃ 過夜,。次日，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌,，下同）,。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌,。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）,。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌,。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)OD值：在豬elisa試劑盒檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,，即為陽性,。

間接法：

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,；

4.（同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮豬elisa試劑盒稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml,；

5.37℃孵育35-60分鐘,，洗滌；

6.’后一遍用DDW洗滌,。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4,、5、6