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進(jìn)口elisa試劑盒操作步驟與保存
閱讀:453 發(fā)布時(shí)間:2020-10-21進(jìn)口elisa試劑盒處理和保存:
1,、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無(wú)菌試管中,。
2,、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉,、肝素,、枸櫞酸鈉),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染,;(也可以直接用抗凝管采集),。
3、 將采集血液用離心機(jī)4℃,,2500rpm離心5min,,,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀,。
4,、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>
5,、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 請(qǐng)注意指標(biāo)說(shuō)明書(shū)上對(duì)于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖?,建議使用EDTA,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清,。
進(jìn)口elisa試劑盒注意事項(xiàng):制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽(yáng)性,。
進(jìn)口elisa試劑盒操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條,未用的板條和干燥劑請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi)壓 實(shí)自封條,,密封口袋,,放回4℃。
2.空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液,,其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品(100ul/孔),,用封板膠紙封
住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育90分鐘,。
3.提前20分鐘準(zhǔn)備生物素化抗體工作液,。
4.洗板5次。
5.空白孔加生物素化抗體稀釋液,,其余孔加入生物素化抗體工作液(100ul/孔),。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育60分鐘,。
6.提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液,。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次,。
8.空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,,其余進(jìn)口elisa試劑盒孔加入酶結(jié)合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,,36℃孵箱,,避光孵育30分鐘。
9.打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序,。
10.洗板5次,。
11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘,。
12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測(cè)量OD450值(3分鐘內(nèi)),。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。
13.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束,。