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小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)檢測試劑盒技術(shù)參數(shù)
閱讀:285 發(fā)布時間:2020-7-20小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)檢測試劑盒檢測范圍:
人,、綿羊、小鼠,、大鼠,、豬、兔,、山羊,、牛,、馬、豬,、其它動物細胞因子,、植物細胞因子、骨代謝,、細胞凋亡,、激素內(nèi)分泌、活性多肽,、肝纖維化、自身抗體,、血栓與止血,、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒,。
elisa試劑盒檢測類型:雙抗體夾心法測抗原,、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體,、競爭法測抗體,、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體,、ABS-ELISA法,。
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)檢測試劑盒操作步驟:
1.使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)檢測試劑盒操作注意事項:
1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。