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探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的檢測(cè)及TaqMan探針?lè)椒?/h3>
閱讀:698 發(fā)布時(shí)間:2020-2-13
探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的檢測(cè)及TaqMan探針?lè)椒?/strong>
紅燈高掛幸福搖,,鞭炮齊鳴天地歡;日子美美心情好,,闔家歡樂(lè)大團(tuán)圓;敬杯美酒送好友,,遙寄祝福無(wú)限好;祝你鼠年交好運(yùn),心想事成萬(wàn)事順!接下來(lái)介紹 探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的檢測(cè)及TaqMan探針?lè)椒?/p>
檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),,從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的檢測(cè)及TaqMan探針?lè)椒?/strong>
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檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),,從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。