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大鼠 IL-10 elisa檢測試劑盒操作過程
閱讀:259 發(fā)布時間:2019-12-13大鼠 IL-10 elisa檢測試劑盒操作過程
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操作過程;
1.將所有試劑充沛混勻,。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯,。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù),。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔,。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi),。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,悄悄振動混勻,,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗刷液,,振動30秒,甩去洗刷液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,,悄悄振動混勻,,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗刷液,,振動30秒,,甩去洗刷液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。假如用洗板機洗刷,,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A,、B各50ul,,悄悄振動混勻,,37℃溫育10分鐘,。防止光照,。
8)取出酶標(biāo)板,,敏捷參加50ul停止液,,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值,。