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技術(shù)文章

犬Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)檢測(cè)試劑盒樣品收集方法

閱讀:311          發(fā)布時(shí)間:2019-12-6

                                  犬Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)檢測(cè)試劑盒樣品收集方法

 

十二月,我想起那年周末我常常出現(xiàn)在阿纖家,,在寒冷的天氣,,我?guī)е弊樱髦鴩?,拿著討厭的?shù)學(xué)卷子聽(tīng)阿纖耐心的講,,講得我自己都覺(jué)得不好意思再問(wèn)一遍。十二月,,我記得我陪著一個(gè)女孩在操場(chǎng)哭了一個(gè)晚自習(xí),,她的眼淚,浸濕我的圍巾,,她倔強(qiáng)的說(shuō)不要上課,。我們傻傻的站在那里,不知道是那年的風(fēng)太大還是那時(shí)候的操場(chǎng)好冷,,我覺(jué)得自己已經(jīng)那木了站在那里,。接下來(lái)介紹 犬Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)檢測(cè)試劑盒樣品收集方法。

 

 

樣品收集:

 

1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè),,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管,。

 

2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),。避免使用溶血,,高血脂樣品。

 

3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測(cè),。

 

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片,。取上清檢測(cè),。

 

5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)

 

6. 樣品應(yīng)清澈透明,,懸浮物應(yīng)離心去除,。

 

7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次使用量分裝,,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),,避免反復(fù)凍融,。

 

8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),,以確定稀釋倍數(shù))。

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