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犬25羥基維生素D3(25 HVD3)檢測(cè)試劑盒保存方法
閱讀:209 發(fā)布時(shí)間:2019-8-15犬25羥基維生素D3(25 HVD3)檢測(cè)試劑盒保存方法
開學(xué)的感受就是不一樣,,心情舒暢極了,想象著新一學(xué)期開始的樣子,,顧不上洗臉?biāo)⒀?,馬馬虎虎的吃了幾片面包,忍不住到了學(xué)校,。接下來介紹 犬25羥基維生素D3(25 HVD3)檢測(cè)試劑盒保存方法.
檢測(cè)范圍:人,、綿羊,、小鼠,、大鼠、豬,、兔,、山羊、牛,、馬,、豬,、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子,、骨代謝,、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌,、活性多肽,、肝纖維化、血栓與止血,、自身抗體科研elisa檢測(cè)試劑盒,。
保存樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,,無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,,高血脂樣品,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè),。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè),。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè)
6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除,。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,,若不能及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),,或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),,避免反復(fù)凍融。
8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)),。