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小鼠ELISA試劑盒操作要素對ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測定過程：固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標(biāo)物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果,。

ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應(yīng)留意以下5個方面。

1. 在成批手藝檢測中,，還應(yīng)留意操作時差的影響,。加樣及混勻時刻的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致,，對競爭法及定量檢測影響很大,，不留意可能會導(dǎo)致過錯成果或定量禁絕。

2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗成敗的一個關(guān)鍵過程,。意圖是除掉未結(jié)合的免疫反響物,，停止抗原抗體反響,，除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì),。可用洗板機洗板或手藝洗板,，前者洗刷質(zhì)量較好,，各反響孔洗刷作用均一，批內(nèi),、批間差異小,，手藝洗板應(yīng)留意操控各孔洗刷作用，差異不宜太大,。

3. 跟著病況的發(fā)展或由其他要素影響,，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標(biāo)本進行預(yù)處理,。直接法測定中,，標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。

4. 加樣一般運用加液器,，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標(biāo)本,、加酶結(jié)合物、加底物和加停止液,。加標(biāo)本時有必要每份標(biāo)本運用一支移液器吸嘴,，避免穿插污染。加酶結(jié)合物,、底物和停止液時則不需更換吸嘴,。