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大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作
閱讀:332 發(fā)布時(shí)間:2018-12-4大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:
1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25),。未用完的放回4℃,。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫),。當(dāng)日使用,。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 于10000×g離心1分鐘,加入標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,,旋緊管蓋,,靜置10分鐘,上下顛倒數(shù)次,,待其充分溶解后,,用移液器將其輕輕混勻(濃度為10ng/mL)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在反應(yīng)孔中進(jìn)行倍比稀釋),。建議配制成以下濃度:10,、5、2.5,、1.25,、0.625、0.313,、0.156,、0ng/mL,標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL,。如配制5ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5mL10ng/mL的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5mL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液的EP管中,,混勻即可,其余濃度依此類推,。
4. 生物素化抗體工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘,,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度,。當(dāng)日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制100-200μL,。使用前15分鐘,,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用,。