詳細介紹
Matrigel 基底膜基質,,Matrigel基質會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,,但是與5%CO2平衡后色差即會減少,。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻,。所有操作均需在無菌環(huán)境下進行,,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥,。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀,。
操作指南:
BD采用技術,從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質,,其主要成分由層粘連蛋白,,Ⅳ型膠原,巢蛋白,,硫酸肝素糖蛋白等組成,,還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基質在室溫條件下,,聚合形成具有生物學活性的三維基質,,模擬體內細胞基底膜的結構、組成,、物理特性和功能,,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,,以及對細胞形態(tài),、生化功能,、遷移、侵染和基因表達的研究,。
BD Matrigel 基底膜基質形成的三維培養(yǎng)基質,,可促進上皮細胞、肝細胞,、Sertoli細胞,、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞,、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化,。同時,Matrigel還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,,支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化,。高濃度的Matrigel適用于研究體內血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。
細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長,,也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長,。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層,可以用于細胞貼壁,,但不能用于細胞的分化研究,。
注意:可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管,所有分裝均需用預冷的凍存管,,迅速冷凍并保存,,避免多次凍融。
Matrigel在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,,因此溶解時在4℃冰上過夜凍融(4度時會隨著溫度的上升部分成膠),。所有用品在使用前需置于冰浴,必須使用預冷的移液管,、吸頭及小管操作Matrigel,。成膠后的Matrigel可以在4℃24-48小時后重新呈液態(tài)。
Yeast extract 酵母浸膏 BR
Bile salt No. 3 3號膽鹽 BR,,90%
Bile salt No. 5 5號膽鹽 BR,,70%
Bile salt No.7 7號膽鹽 BR
Bile salt from sheep 羊膽鹽 BR
Bile salt from ox 牛膽鹽 BR,60%
Bile salt from pig 豬膽鹽 BR,,65%
Bile salt from poultry 禽膽鹽 BR
Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
Casamino acid 酪蛋白水解物 BR