詳細介紹
細胞名稱 獼猴肌肉細胞,;MMm7品牌
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性獼猴的肌肉組織,。2006年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
傳代方法 1:
2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
獼猴肌肉細胞,;MMm7品牌操作流程:
※主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡),co2孵箱,。
※細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
?細胞的復蘇培養(yǎng):從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時不斷搖動使之迅速融化,,然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
?細胞傳代:原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
?細胞形態(tài)的觀察:在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
?生長曲線:取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數每孔細胞的數目并計算平均值,。連續(xù)計數10d,,繪制細胞生長曲線
?細胞的貼壁率:指數生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化,、計數已貼壁細胞,,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,,計算貼壁率,。
?細胞的計數:常規(guī)消化細胞,待細胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104,。
獼猴肌肉細胞;MMm7品牌本公司專業(yè)代理ATCC細胞,,提供售前售后服務,,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請,。
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獼猴肌肉細胞,;MMm7品牌
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