化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1211 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎組織 | 種屬來(lái)源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) | 小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 1×106 |
商品貨號(hào) | A01X1211 |
細(xì)胞詳述
腎系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非?；钴S的細(xì)胞，具有分泌細(xì)胞基質(zhì),、產(chǎn)生細(xì)胞因子,、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類(lèi)似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。同時(shí)還可產(chǎn)生和降解多種細(xì)胞外基質(zhì),，參與系膜基質(zhì)及腎小球基底膜的修復(fù)與更新,，在腎小球生理功能和病理反應(yīng)中起著重要作用。
該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因,。
注意事項(xiàng)： 收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代,，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,。
細(xì)胞特性
1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎組織,。
2) 細(xì)胞鑒定：結(jié)蛋白（Desmin）免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。
4) 不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一,、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二,、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,，去除小腦和間腦,。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì)。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min,，去上清液。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min,，4℃),，1000×g，4℃離心10min,。
十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min,，室溫)，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS,，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 |
PCID1蛋白抗體 | AF555標(biāo)記的鋅指蛋白197抗體 |
Marc145非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的SPRED2蛋白抗體 |
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的白介1β/IL-1β抗體 |
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 |
VERO非洲綠猴腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的LMBRD2蛋白抗體 |
VERO非洲綠猴腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的肝癌相關(guān)蛋白2抗體（轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體） |
VERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的叉頭蛋白P3抗體 |
VERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的NFE2相關(guān)因子1抗體 |
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的干擾epsilon 1蛋白抗體 |
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的甲卡/2-(甲基氨基)-1-苯基-1-單克隆抗體 |
UMNSAH/DF-1雞胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化AF555標(biāo)記的磷化細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體 |
UMNSAH/DF-1雞胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的FBXO42蛋白抗體 |
DH-82狗腎惡性組織增生癥細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的EHD4蛋白抗體 |
pac2斑馬魚(yú)胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的二甲基化組蛋白H3K9抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
化工儀器網(wǎng)