大鼠口腔黏膜上皮細胞的相關產品：小鼠支氣管上皮細胞人大隱靜脈內皮細胞小鼠成骨細胞大鼠成骨細胞人脈絡膜血管內皮細胞小鼠關節(jié)軟骨細胞大鼠關節(jié)軟骨細胞人顱蓋造骨細胞人滑膜細胞小鼠表皮角質形成細胞大鼠表皮角質形成細胞人骨骼肌細胞小鼠毛囊細胞大鼠毛囊細胞人關節(jié)軟骨細胞

大鼠口腔黏膜上皮細胞

一,、細胞基本屬性

 

培養(yǎng)基：原代上皮細胞培養(yǎng)體系

傳代特性：根據細胞特性

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ,，95%；  CO2 ,，  5%

細胞簡介：口腔上皮細胞是一種上皮細胞,。人的口腔上皮細胞是扁平,、多邊形的 ，形狀不很 規(guī)則,。   口腔各壁都有黏膜覆蓋,。  口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側頰部。

上皮的垂直切面上 ,，細胞形狀不一,。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀 ，為具有 增殖分化能力的干細胞 ,，部分子細胞向淺層移動,。基底層以上是數層多邊形細胞 ,，再上為幾層梭形或扁平細胞,。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀 ，基底層細胞能不 斷分裂增生 ,，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞,。復層扁平上皮深層的結締組織 內有豐富的毛細血管 ，有利于復層扁平上皮的營養(yǎng),。
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機體中取出,，經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定,。

實驗步驟：

一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。

二、在超凈工作臺中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。

三,、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。

四,、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質,。

五、大腦皮質放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小,，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶,，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六,、室溫1 000×g離心8min,，去上清液。

七,、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。

九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。

十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。

加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃,、5％CO2培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液,。

注意事項：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,；由于運輸的原因,，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
公司正在出售的產品：