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詳細(xì)介紹
組織來源：骨髓
種屬來源：豬
細(xì)胞簡介：豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細(xì)菌、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的,、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,，可以向骨、軟骨,、肌組織,、皮膚、脂肪,、神經(jīng)等多種組織分化,，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,，BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,，含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件：要求較高,，在培養(yǎng)過程中,，受貼壁時間、種植密度,、血清含量,、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基：pH值等條件的影響。
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2283 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三,、使用方法
豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠棕色前脂肪細(xì)胞 | 小鼠心肌成纖維細(xì)胞 |
磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白重組兔單克隆抗體 | AF350標(biāo)記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 |
小鼠腎成纖維細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的原鈣粘附蛋白α2抗體 |
大鼠腎成纖維細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的等電壓依賴性陰離子通道抗體 |
人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的粘蛋白17抗體 |
小鼠尿道上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的同源盒蛋白SIX4抗體 |
大鼠尿道上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的干擾調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體 |
人腎動脈平滑肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的松弛3抗體 |
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的凋亡相關(guān)蛋白激樣蛋白1抗體 |
大鼠輸尿管上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 |
人腎成纖維細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體 |
人膀胱成纖維細(xì)胞 | 豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞AF350標(biāo)記的LSM4蛋白抗體 |
小鼠心肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的磷化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
大鼠心肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的磷化微管相關(guān)蛋白抗體 |
人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的線粒體裂變1蛋白抗體 |
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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