化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
組織來源：骨髓
種屬來源：豬
細胞簡介：豬骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,，可以向骨,、軟骨、肌組織,、皮膚,、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,，因此可以作為組織工程中的種子細胞,。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%,，含量極低,。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件：要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間,、種植密度,、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基：pH值等條件的影響,。
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%
一,、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
豬骨髓間充質(zhì)干細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X2283 |
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三,、使用方法
豬骨髓間充質(zhì)干細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,，在技術部標準操作流程下,，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min,，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；
4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱),。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠棕色前脂肪細胞 | 小鼠心肌成纖維細胞 |
磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白重組兔單克隆抗體 | AF350標記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 |
小鼠腎成纖維細胞 | AF350標記的原鈣粘附蛋白α2抗體 |
大鼠腎成纖維細胞 | AF350標記的等電壓依賴性陰離子通道抗體 |
人腎動脈內(nèi)皮細胞 | AF350標記的粘蛋白17抗體 |
小鼠尿道上皮細胞 | AF350標記的同源盒蛋白SIX4抗體 |
大鼠尿道上皮細胞 | AF350標記的干擾調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體 |
人腎動脈平滑肌細胞 | AF350標記的松弛3抗體 |
小鼠輸尿管上皮細胞 | AF350標記的凋亡相關蛋白激樣蛋白1抗體 |
大鼠輸尿管上皮細胞 | AF350標記的轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 |
人腎成纖維細胞 | AF350標記的鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標記物抗體 |
人膀胱成纖維細胞 | 豬骨髓間充質(zhì)干細胞AF350標記的LSM4蛋白抗體 |
小鼠心肌細胞 | AF350標記的磷化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
大鼠心肌細胞 | AF350標記的磷化微管相關蛋白抗體 |
人心臟微血管內(nèi)皮細胞 | AF350標記的線粒體裂變1蛋白抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和技術部溝通,；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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