人成骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠輸尿管上皮細(xì)胞大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠外周血白細(xì)胞大鼠外周血單個核細(xì)胞大鼠外周血中性粒細(xì)胞大鼠微血管周細(xì)胞HCⅡ 人肝輔因子ⅡELISA檢測試劑盒LC1 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體ELISA檢測試劑盒sTRAIL 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體ELISA檢測試劑盒PSA 人前列腺特異性抗原ELISA檢測試劑盒fPSA 人游離前列腺特異性抗

組織來源：顱骨組織

種屬來源：人

細(xì)胞簡介：人成骨細(xì)胞分離自顱骨組織,；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用,。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,，內(nèi)有顱腔,，容納腦，共8塊,。面顱為顱的前下部分,，包含眶、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),，構(gòu)成面部的支架，共15塊,。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化,。骨不斷地進行著重建,，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),，形成骨吸收陷窩；其后,，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨,；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),，也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形

傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
一,、細(xì)胞基本屬性

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

人成骨細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈梭形、多角形,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗,。

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。