化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
組織來源：乳房組織
種屬來源：豬
細(xì)胞簡介：乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,。淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚,，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中,。乳房腺體由15-20個腺葉組成，每一腺葉分成若干個腺小葉,，每一腺小葉又由10-100個腺泡組成,，這些腺泡緊密地排列在小乳管周圍，腺泡的開口與小乳管相連,。
乳腺上皮細(xì)胞來源于乳腺小葉中,。它們與腺體導(dǎo)管和脂肪組織一起在乳腺中形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),。乳腺上皮細(xì)胞在人和動物體出生、發(fā)育和妊娠中均會受荷爾蒙調(diào)控而進(jìn)行一系列的增長,、遷移和分化,。激素水平失調(diào)、細(xì)胞外基質(zhì)的變化和其它的基因因素都會導(dǎo)致乳腺上皮細(xì)胞惡性增長,，終導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生,。了解乳腺上皮細(xì)胞的特性可以幫助我們理解乳腺癌的病例機(jī)制以及為治療確定新的靶點(diǎn)
培養(yǎng)基：原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣，多角形細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
一,、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
豬乳腺上皮細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2277 |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
豬乳腺上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,，細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣,，多角形細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞 | 人腦膜細(xì)胞 |
磷化絲氨單克隆抗體 | AF350標(biāo)記的小鼠抗聚組氨單克隆抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的蛋白激A抗體 |
人腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的白三烯A4水解抗體 |
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的1號染色體開放閱讀框31抗體 |
大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的半胱胺蛋白蛋白-12抗體 |
人腦動脈血管平滑肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 |
小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的蛋白激A錨定蛋白7抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的腺苷環(huán)化1抗體 |
人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的去整合樣金屬蛋白32抗體 |
小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞 | 豬乳腺上皮細(xì)胞AF350標(biāo)記的內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨激抗體 |
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的磷酯Cβ1抗體 |
小鼠虹膜色上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體 |
大鼠角膜成纖維細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的周期依賴性激3抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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