大鼠脊髓神經(jīng)元細胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腦瘤細胞人胚胎眼鞏膜成纖維細胞人正?？谇唤琴|(zhì)細胞人腦星形膠質(zhì)瘤細胞人胃平滑肌細胞人膀胱平滑肌細胞人外周血B淋巴細胞促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒促胰液/胰泌(Secretin)ELISA試劑盒促胰液/分泌受體(SR)ELISA試劑盒促性腺激釋放激(GnRH)ELISA試劑盒促酰化蛋白(ASP)ELISA試劑盒促胃液受體(GsaR)ELISA

組織來源：脊髓組織

種屬來源：大鼠

細胞簡介：大鼠脊髓神經(jīng)元細胞分離自脊髓組織,；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面,，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),，分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成,；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成,；脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官,。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的,。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元，即神經(jīng)細胞,，其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大,。但都具有胞體和樹突,、軸突。胞體又叫核周體,，內(nèi)含神經(jīng)絲,、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、游離核糖體和一個有明顯核仁的核,。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀,，稱為尼氏小體,。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起，能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,，突起的大小和形態(tài)各不相同,，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細胞,，神經(jīng)元含量少,，分離純化難度大，且脊髓神經(jīng)元細胞是高度分化的終末細胞,，不能分裂增殖,，培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,，體積小,，透亮，無突起,。培養(yǎng)2-3d,，可見胞體增大，突起增多延長,；培養(yǎng)6-7d,，細胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),，光暈明顯,，立體感強。培養(yǎng)20d后,，死亡細胞明顯增加,，細胞出現(xiàn)內(nèi)空泡，突起粗細不均,，甚至脫壁,，發(fā)生細胞崩解。

培養(yǎng)基：含B-27 Supplement,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：PLL(0.1mg/ml)

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：神經(jīng)元細胞樣

傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.125%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

傳代比例：不傳代
一,、細胞基本屬性

二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

大鼠脊髓神經(jīng)元細胞是一種貼壁細胞,，細胞形態(tài)呈神經(jīng)元細胞樣,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細胞可傳2-3代,；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗,。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液,，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm,，離心5min,，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四,、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。